ARMS-PCR: A More Precise Take on PCR
एआरएमएस-पीसीआर, या एम्प्लीफिकेशन रिफ्रैक्टरी म्यूटेशन सिस्टम पीसीआर, आणविक विकृति विज्ञान में उपयोग की जाने वाली पॉलीमरेज़ चेन रिएक्शन (पीसीआर) तकनीक का एक प्रकार है। यहां इसकी विशिष्टताओं का विवरण दिया गया है:
ARMS-PCR: तकनीक क्या है?
जबकि मानक पीसीआर अनुक्रम भिन्नताओं की परवाह किए बिना एक विशिष्ट डीएनए क्षेत्र को बढ़ाता है, एआरएमएस-पीसीआर लक्ष्य क्षेत्र के भीतर उत्परिवर्तित और सामान्य अनुक्रमों के बीच अंतर करने के लिए एक चतुर चाल को शामिल करता है।
यह काम किस प्रकार करता है?
- नमूना तैयार करना: पीसीआर के समान, डीएनए को एक नैदानिक नमूने से निकाला जाता है।
- प्राइमर डिज़ाइन: एआरएमएस-पीसीआर तीन प्राइमरों का उपयोग करता है:
o बाहरी प्राइमर: ये लक्ष्य डीएनए क्षेत्र के पार्श्व में होते हैं और सभी विविधताओं (सामान्य और उत्परिवर्तित) के लिए सामान्य होते हैं।
o आंतरिक प्राइमर: दो आंतरिक प्राइमर हैं जो विशेष रूप से सामान्य अनुक्रम या उत्परिवर्तित अनुक्रम के लिए डिज़ाइन किए गए हैं। प्रत्येक आंतरिक प्राइमर में 3′ सिरे (पूंछ) पर एक बेमेल होता है जो इसे गैर-पूरक अनुक्रम (उत्परिवर्तित प्राइमर के लिए सामान्य और इसके विपरीत) से कुशलतापूर्वक जुड़ने से रोकता है।
- थर्मल साइक्लिंग: प्रतिक्रिया मानक पीसीआर के समान ताप और शीतलन चक्र से गुजरती है।
- प्रवर्धन और पता लगाना: प्रत्येक चक्र के दौरान, बाहरी प्राइमर लक्ष्य क्षेत्र से जुड़ सकते हैं, जिससे कुछ प्रवर्धन की अनुमति मिलती है। हालाँकि, केवल वर्तमान अनुक्रम (सामान्य या उत्परिवर्तित) से पूरी तरह मेल खाने वाला आंतरिक प्राइमर ही प्रवर्धन प्रक्रिया को कुशलतापूर्वक विस्तारित और पूरा करेगा। फिर विभिन्न तरीकों का उपयोग करके प्रवर्धित उत्पादों का पता लगाया जाता है।
पैथोलॉजी विभाग जो एआरएमएस–पीसीआर का उपयोग करते हैं?
- आणविक विकृति विज्ञान: विभिन्न रोग संदर्भों में उत्परिवर्तन का पता लगाने के लिए एआरएमएस-पीसीआर का उपयोग करने वाला प्राथमिक विभाग।
- ऑन्कोलॉजी: इसका उपयोग कैंसर से जुड़े जीन में विशिष्ट उत्परिवर्तन का पता लगाने के लिए किया जा सकता है।
- संक्रामक रोग: दवा प्रतिरोध से जुड़े वायरस या बैक्टीरिया में विशिष्ट उत्परिवर्तन का पता लगाने के लिए कुछ अनुप्रयोग मौजूद हैं।
नैदानिक उपयोगिता:
- उत्परिवर्तन का पता लगाना: विरासत में मिली बीमारियों, कैंसर की प्रवृत्ति, या रोगज़नक़ दवा प्रतिरोध से जुड़े जीन में विशिष्ट उत्परिवर्तन की पहचान करने के लिए एआरएमएस-पीसीआर एक मूल्यवान उपकरण है।
- निदान और जोखिम स्तरीकरण: विशिष्ट उत्परिवर्तन का पता लगाने से कुछ बीमारियों का निदान करने में मदद मिल सकती है और भविष्य की जटिलताओं के लिए उपचार निर्णय या जोखिम स्तरीकरण का मार्गदर्शन किया जा सकता है।
प्रौद्योगिकी के लाभ:
- उच्च विशिष्टता: एआरएमएस-पीसीआर विशेष रूप से लक्ष्य क्षेत्र के भीतर सामान्य और उत्परिवर्तित अनुक्रमों के बीच अंतर करता है।
- अपेक्षाकृत सरल और तेज़: मानक पीसीआर के बुनियादी सिद्धांतों और गति को साझा करता है।
- लागत प्रभावी: कुछ डीएनए अनुक्रमण विधियों की तुलना में
संबंधित पैथोलॉजी परीक्षण:
- मानक पीसीआर: एआरएमएस-पीसीआर विश्लेषण से पहले लक्ष्य क्षेत्र के प्रारंभिक प्रवर्धन के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है।
- डीएनए अनुक्रमण: डीएनए टुकड़े का पूरा अनुक्रम प्रदान करता है, लेकिन उत्परिवर्तन का पता लगाने के लिए एआरएमएस-पीसीआर की तुलना में अधिक महंगा और समय लेने वाला हो सकता है।
- कैरियोटाइपिंग: असामान्यताओं के लिए संपूर्ण गुणसूत्र सेट का विश्लेषण करता है।
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